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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
AAF固定液 |
500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85654 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預冷;所有器具須放-20℃冰箱預冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應按照規(guī)定程序處理。
人性結合球蛋白(SHBG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人內皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
血管內皮生長因子受體2 48T/96T
血小板糖蛋白vi 48T/96T
人布病抗體(Brucellosis-Ab)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
兔子白介素9(IL-9)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
S-100蛋白 48T/96T
犬腫瘤壞死因子α (TNF-α)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-Fodrin IgG/IgA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
AAF固定液人胱天蛋白酶9 規(guī)格: 48T Casp-9(Human Caspase-9) ELISA Kit
人血管緊張素轉化酶 規(guī)格: 48T ACE(Human Angiotensin converting enzyme) ELISA Kit
人α橫紋肌肌動蛋白 規(guī)格: 48T Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit
人類似RIKEN cDNA 2610307008 基因 規(guī)格: 48T Human similar to RIKEN cDNA 2610307008 gene ELISA Kit
人孤腓肽 規(guī)格: 48T OFQ/N(Human orphanin FQ/nociceptin) ELISA Kit
人凝聚素 規(guī)格: 48T CLU(Human clusterin) ELISA Kit
人B受體 規(guī)格: 48T BCR(Human B cell receptor) ELISA Kit
人雄結合蛋白 規(guī)格: 48T ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit
人活化凝血因子Ⅻ 規(guī)格: 48T F XII a(Human activated coagulation factor XII ) ELISA Kit
人功能相關抗原3 規(guī)格: 48T Human lymphocyte function associated antigen 3,LFA-3 ELISA Kit
人apelin 12 規(guī)格: 48T Human apelin 12,AP12 ELISA Kit
M-ENDO broth 膜過濾ENDO肉湯 1.10750.0500MERCK默克
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLEY(base) 膜過濾腸球選擇瓊脂(基礎) 1.05289.0500MERCK默克
Membrane-fiter Enterococcus selective agar acc.to SLANETZ and BARTLE 1.05262.0500MERCK默克
Esculin bile agar 七葉苷膽鹽瓊脂 1.11432.0500MERCK默克
FRASER Listeria Selective Enrichment Broth( base) 1.10398.0500MERCK默克
膜過濾腸球選擇瓊脂
弗雷澤李斯特選擇富集肉湯(基礎)
Thioglycolate medium G 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基G 1.16761.0500MERCK默克
Fluid thilglycolate medium 疏基乙酸鹽培養(yǎng)基 1.08191.0500MERCK默克
FRASER Listeria Selective Supplement 弗雷澤李斯特選擇添加劑 1.10399.0001MERCK默克