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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液 |
100ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85636 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
白介素-33 48T/96T
人抗內(nèi)膜抗體(EMAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人(Human)幽門螺旋桿抗體IgG(HP-IgG)ELISA試劑盒48T/96T48T/96T 組裝/原裝
大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
白介素-20 48T/96T
小鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胰抑制素(Pancreastatin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
猴子熱休克蛋白糖蛋白96(HSP gp96)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠載脂蛋白H(Apo-H)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
心肌肌鈣蛋白1 48T/96T
人網(wǎng)膜素(omentin)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
檸檬酸鈉-EDTA抗原修復(fù)液磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-ATF2(Thr69/71)
蛇毒蛋白巴曲酶抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Batroxobin
B特異性轉(zhuǎn)錄因子抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-BOb-1
鈣調(diào)節(jié)素抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Calmodulin/CAM
組織蛋白酶E抗體 規(guī)格: 0.1ml anti-Cathepsin E
表面趨化因子受體6抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CXCR6
CD45RO抗 規(guī)格: 0.1ml Anti-CD45RO
磷酸化CD19抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-CD19 (Tyr531)
毒性受體NK-p30抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CD337/NKp30/NCR3
磷酸化c-fos抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-c-Fos (Ser32)
角蛋白19抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CK19
檢定培養(yǎng)基2號(hào)(pH 7.9±0.1) 250(g)
檢定培養(yǎng)基2號(hào)(pH 6.5-6.6) 250(g)
檢定培養(yǎng)基3號(hào) 250(g)
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL) 1000(g)
0.5%葡萄糖肉湯培養(yǎng)基 250(g)
膽鹽乳糖培養(yǎng)基(BL) 250(g)
肉湯瓊脂培養(yǎng)基 250(g)
玫瑰紅鈉瓊脂 250(g)
玫瑰紅鈉瓊脂 1000(g)
普通瓊脂斜面培養(yǎng)基(pH8.0-8.2) 250(g)