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自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
細胞勻漿緩沖液 |
100ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85622 |
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16) ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
腦前列腺素D2合成酶 48T/96T
組織蛋白酶S 48T/96T
蛋白S 48T/96T
人羥賴氨酸(Hyl)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
保護素 48T/96T
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
GC球蛋白 48T/96T
小鼠紅細胞**素(EPO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人磷酯酶C(PLC)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
細胞勻漿緩沖液增殖潛能相關(guān)蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg P2P-R/RBBP6(proliferation potential protein related)
乙肝病毒pre-X蛋白抗原(C端) 規(guī)格: 0.5mg pre-X protein(CT)[Hepatitis B virus C-Terminus]
線粒體促凋亡蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg Smac/DIABLO(the second mitochondrial activator of caspase)
Toll樣受體3抗原 規(guī)格: 0.5mg TLR3 (Toll-like receptor 3)
血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗原 規(guī)格: 0.5mg VWF (Von Willebrand Factor)
II 型膠原(抗原) 規(guī)格: 0.5mg Anti-Collagen II
中分子量神經(jīng)絲蛋白(抗原) 規(guī)格: 0.5mg NF-M (Neurofilament triplet M)
抗組蛋白H3樣蛋白(N端抗原) 規(guī)格: 0.5mg histone H3-like protein
精子相關(guān)抗原5(多肽抗原) 規(guī)格: 0.5mg SPAG5/map126
鏈霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白 規(guī)格: 10mg streptomycin/OVA
人IV型膠原 規(guī)格: 48T Collagen IV
膽硫乳瓊脂(DHL) 1000(g)
三糖鐵瓊脂(TSI) 250(g)
SS瓊脂 250(g)
亞利桑那瓊脂(SA) 100(g)
HE瓊脂(HE) 1000(g)
SS瓊脂 1000(g)
賴氨酸脫羧酶培養(yǎng)基 5(g)
氯化鎂孔雀綠肉湯(MM/RV/R10) 250(g)
HE瓊脂(HE) 250(g)
尿素瓊脂基礎(chǔ) 250(g)