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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細胞中提取
1.收集約 10 8個細胞,3000rpm 5min(懸浮細胞直接離心,貼壁細胞使用細胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
洗滌液 |
100ml/500ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85566 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準備:
1.離心機
2.振蕩器
3.勻漿機/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
山羊雌二醇(E2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓素B2(TXB2)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝促黃體(LH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
骨形成蛋白1 48T/96T
人還原型谷胱甘肽(GSH)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
單核細胞集落刺激因子1受體 48T/96T
人γ氨基丁酸(GABA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人肌紅蛋白(MYO/MB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glutamate Dehydrogenase 1 48T/96T
洗滌液血管內(nèi)皮生長因子受體-3(多肽) 規(guī)格: 0.5mg VEGFR-3/FLt-4
間隙連接蛋白43(多肽片斷抗原) 規(guī)格: 0.5mg Connexin-43(Cx43)
抗組蛋白H3樣抗原 規(guī)格: 0.5mg histone H3-like protein
神經(jīng)激肽B受體(抗原) 規(guī)格: 0.5mg NKR(Neuromedin B Receptor)
抗干燥癥SSB/La蛋白抗原 規(guī)格: 0.5mg SSB/La(Sjogren syndrome type B Anti-gen)
青霉素G偶聯(lián)雞卵白蛋白 規(guī)格: 2mg Penicillin G/OVA
人噬酸性粒趨化因子 規(guī)格: 48T Eotaxin human
人III型前膠原肽(C端) 規(guī)格: 48T PIIICP
人巨噬炎性蛋白-2 規(guī)格: 48T MIP-2
人堿性成纖維因子 規(guī)格: 48T BFGF
人Caspase-1 規(guī)格: 48T Caspase-1
M –肉湯 現(xiàn)貨促銷 250 用于干燥食品和種子中沙門氏增培養(yǎng)(MERCK方法)
煌綠瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于沙門氏的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
煌綠黃胺嘧啶瓊脂 現(xiàn)貨促銷 250 用于沙門氏的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
BGS 瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于沙門氏的分離培養(yǎng)(USDA-FSIS方法)
堿性蛋白胨水 現(xiàn)貨促銷 250 用于霍亂弧選擇性增培養(yǎng)(SN標準)
化鈉多粘素B肉湯基礎(chǔ)(SCPB) 現(xiàn)貨促銷 250 用于副溶血性弧選擇性增培養(yǎng),用前應(yīng)無加入多粘素B(SN標準)
TCBS瓊脂 特價供應(yīng) 250 用于致病性弧的選擇性分離(GB、SN標準)
多粘素B 特價供應(yīng) 2.5萬單位/支*5 添加于100mlHB4131中
精氨酸雙水解酶試驗用培養(yǎng)基(AD) 現(xiàn)貨促銷 5 生化培養(yǎng)基,用于弧的精氨酸試驗