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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒 |
100ml/200ml |
|
|
2-8℃ |
BH-D85554 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人表面膜球蛋白M(mIgM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛甘膽酸(CG)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
成纖維生長(zhǎng)因子-4 48T/96T
豬核轉(zhuǎn)錄因子kb-p65(NF-kB p65)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓前體蛋白(TpP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人抗腎上腺皮質(zhì)抗體(AAA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
β細(xì)胞素 48T/96T
扁豆凝集素(LCA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
乳腺癌標(biāo)志物-CA153 48T/96T
人膽堿乙?;?/span>(CHAc)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人?;碳さ鞍?/span>(ASP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
增強(qiáng)型ECL化學(xué)發(fā)光檢測(cè)試劑盒KB抑制蛋白激酶α抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-IKK alpha
白介素27受體抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-IL-27R/TCCR
雞傳染性喉氣管炎病毒抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-ILTV
磷酸化胰島素受體底物-1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-IRS1(Ser1101)
肺Kruppel樣因子抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-KLF2
磷酸化腫瘤抑制基因LATS1抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-LATS1 (Thr1079)
Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-DAXX
核纖層蛋白B抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Lamin B
單核趨化蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-MCP-3/CCL7
肌球蛋白輕鏈激酶抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-MLCK
促黑α抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Alpha-MSH/POMC
LB瓊脂 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
玉米粉瓊脂培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250(g)
高氏一號(hào)合成培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
L型細(xì)高滲糖增培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250(g)
L型細(xì)高滲鹽增培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
乙基紫疊氮鈉肉湯 特價(jià)供應(yīng) 250(g)
疊氮鈉葡萄糖肉湯 現(xiàn)貨促銷 250(g)
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷 250(g)
孟加拉紅(虎紅)培養(yǎng)基 特價(jià)供應(yīng) 1000(g)