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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
透析袋,截留分子量300KD;直徑49mm;壓平寬度77mm |
1卷,24M |
|
|
2-8℃ |
BH-D85524 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以?xún)?yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子6(bFGF-6)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
巨噬細(xì)胞炎性蛋白-1α 48T/96T
二胺氧化酶 48T/96T
人血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人表面膜球蛋白D(mIgD)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人B-細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
補(bǔ)體蛋白3 48T/96T
小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原30配體(sCD30L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人羥脯氨酸(Hyp)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠抗線粒體抗體M2亞型(AMA-M2)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
透析袋,截留分子量300KD;直徑49mm;壓平寬度77mm 磷酸化分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-cdc25C (Ser216)
HER4抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-HER4/ErbB4
角蛋白16抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-CK16
鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CNR-2/PCDHA 6
促腎上腺皮質(zhì)釋放受體1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-CRHR1/CRFR1
周期素G抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-Cyclin G
腫瘤調(diào)亡素/死亡受體5抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Death receptor 5/DR5/CD262
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 規(guī)格: 0.2ml Anti-DcR1/TNFRSF10C
表皮生長(zhǎng)因子抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-EGF
DNA切除修復(fù)蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-ERCC1
肺鼠疫耶爾森氏F1莢膜蛋白抗體(N端) 規(guī)格: 0.2ml Anti-F1 operon positive regulatory protein(NT)
胰蛋白胨大豆肉湯 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250 用于金黃色葡萄球的MPN測(cè)定,增培養(yǎng),NaCl濃度可根據(jù)需要而調(diào)整(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ) 特價(jià)供應(yīng) 250 用于金黃色葡萄球的選擇性分離培養(yǎng)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
亞碲酸鹽卵黃增液 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 5ml*10 加入Baird-Parker瓊脂基礎(chǔ)中
兔血漿 特價(jià)供應(yīng) 0.5ml*20 用于金黃色葡萄球凝固酶試驗(yàn)
DNA酶瓊脂 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 100 用于核糖核酸酶檢測(cè)
腸產(chǎn)毒培養(yǎng)基 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250 用于金黃色葡萄球腸產(chǎn)毒試驗(yàn)
7.5%化鈉肉湯 特價(jià)供應(yīng) 250 用于金黃色葡萄球的增培養(yǎng)(GB標(biāo)準(zhǔn))
亞碲酸鈉肉湯培養(yǎng)基基礎(chǔ) 特價(jià)供應(yīng) 250 用于金黃色葡萄球的增培養(yǎng)。每100ml培養(yǎng)基需另加入1%亞碲酸鈉1ml
葡萄球增肉湯 現(xiàn)貨促銷(xiāo) 250 用于凝固酶陽(yáng)性葡萄球的選擇性增