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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
囊泡提取試劑盒-細(xì)胞培養(yǎng)上清 |
50T |
|
|
|
BH-D85478 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
人腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(TRAIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體(M-CSFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人可替?。?/span>Cotinine)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
非對(duì)稱性二甲基精氨酸 48T/96T ADMA Asymmetric Dimethylarginine
G蛋白耦聯(lián)受體相關(guān)蛋白APJ 48T/96T
小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
牛白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠游離甲狀腺素(FT4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
原發(fā)性肝癌 48T/96T
囊泡提取試劑盒-細(xì)胞培養(yǎng)上清熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6激酶RSK2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-RSK2 (Tyr529) /FITC
熒光素標(biāo)記Lpin1 抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Lpin1 protein/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-MARCKS (Ser162) /FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-MEK1/2 (Ser221)/FITC
熒光素標(biāo)記肌球蛋白輕鏈3抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-MYL3/Myosin light chain 3 /FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化有絲分裂原和應(yīng)激活化型蛋白激酶1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-MSK1 (Ser376) /FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-NF-KappaB p105 (Ser933)/FITC
熒光素標(biāo)記NCK銜接因子蛋白2抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-nck2/FITC
熒光素標(biāo)記磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型)IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Phospho-eNOS (Ser1177) /FITC
熒光素標(biāo)記核受體相關(guān)因子-1抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-Nurr1/FITC
熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠、兔、馬、犬、豬、牛磷酸化絲裂原活化蛋白激酶p38抗體IgG 規(guī)格: 0.2ml Anti-phospho-p38 ERK/MAPK14 (pThr180/pTyr182) /FITC
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