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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實驗選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號 |
組織胞漿/胞核分離試劑盒 |
50T/100T |
提取 |
動物組織 |
2-8℃ |
BH-D85430 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開蓋時液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
實驗過程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個過程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。
注意事項:
1. 正式實驗前請選取幾個樣本做預(yù)實驗,以優(yōu)化實驗條件,取得佳實驗效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會導(dǎo)致錯誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實驗后完成后所有樣品及接觸過的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素A 48T/96T
人FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠同型半胱氨酸(Hcy)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
菜豆凝集素(PHA)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
小鼠胰島素受體β(ISR-β)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人糖皮質(zhì)(Glucocorticoid)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
鵝乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
組織胞漿/胞核分離試劑盒人鳥苷酸結(jié)合蛋白4 規(guī)格: 48T Gbp4(Human guanylate nucleotide binding protein 4) ELISA Kit
人低密度脂蛋白 規(guī)格: 48T LDL(Human low density lipoprotein) ELISA Kit
人腸脂肪酸結(jié)合蛋白 規(guī)格: 48T iFABP(Human intestinal fatty acid binding protein) ELISA Kit
人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1 規(guī)格: 48T FDFT1(Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1) ELISA Kit
人肽基脯氨酰順反異構(gòu)酶 規(guī)格: 48T PPI(Human Peptidyl prolyl cis/trans isomerase) ELISA Kit
人5核苷酸酶 規(guī)格: 48T 5-NT(Human 5-Nucleotidase) ELISA Kit
人基質(zhì)金屬蛋白酶7 規(guī)格: 48T (MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit
人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶 規(guī)格: 48T PDI(Human protein disulfide isomerase) ELISA Kit
人可溶性肌球蛋白重鏈1 規(guī)格: 48T sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit
人Bκ 輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε 規(guī)格: 48T Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit
人蛋白S 規(guī)格: 48T Human Protein S ELISA Kit
多用離心管架0.2ml-1.5ml-15ml-50ml 32-32-12-4 個
抗A抗B血型定型試劑(單克隆抗體)-抗A抗B 血清 10ml×2 盒
Dextran 右旋糖酐5000 10g 瓶
Sodium iodoacetate 碘代乙酰胺鈉鹽 5g 瓶
Solar Fluor 555(效果同Alexa Fluor 555)琥珀酰亞胺酯 1 mg 支
普魯士藍(lán)染色試劑盒(Perls stain 伊紅法) 2×50ml 盒
RNase A 25mg 瓶
L-Aspartic acid L-天冬氨酸(水物) 25g 瓶
隨機(jī)引物Random(10uM) 250ul 支
SABC(小鼠IgG)-POD kit 100-200T 盒