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操作步驟:
A:組織中提取
1.收集 0.1g 組織,加入 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上用組織研磨器或勻 漿管研磨。
2.將勻漿后樣品轉(zhuǎn)移至 1.5ml 離心管中,11000rpm 5min,吸棄上清保留沉淀。
3.至步驟 2。
B:細(xì)胞中提取
1.收集約 10 8個(gè)細(xì)胞,3000rpm 5min(懸浮細(xì)胞直接離心,貼壁細(xì)胞使用細(xì)胞刮刀或胰蛋白酶消化離心收集 均可。注意用預(yù)冷 PBS 清洗殘留培養(yǎng)基和胰蛋白酶等),吸棄上清。
2.至步驟 1。
步驟 1:加 1.0ml Lysis Buffer 1 及適量蛋白酶抑制劑(依據(jù)實(shí)驗(yàn)選擇),冰上孵育 30min(每 10min 用移液槍 吹打一次),4°C 11000rpm 離心 5min,棄上清。
步驟 2:于上述步驟離心管中加入 200μl Lysis Buffer 2,置于冰上 30min(每 10min 渦旋一次),4°C 11000rpm 離心 5min,吸取上清于一新離心管中。
步驟 3:加入 40μl Balance Buffer 于上述步驟離心管中,用移液槍輕輕吹勻。
步驟 4:使用 BCA 定量試劑盒定量。
步驟 5:于步驟 3 離心管中加入 2.4μl Adjust Buffer,輕輕吹勻,并應(yīng)用于下游研究。
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
檢測(cè)方法 |
適用樣本 |
保存溫度 |
貨號(hào) |
改良Lowry法蛋白定量試劑盒 |
500T/ 1000T |
酶標(biāo)儀或分光光度計(jì) |
蛋白樣本 |
2-8℃ |
BH-D85418 |
自備儀器和試劑耗材:
儀器準(zhǔn)備:
1.離心機(jī)
2.振蕩器
3.勻漿機(jī)/勻漿器
4.渦旋混勻器
5.移液器
6.冰箱
7.冰盒
試劑準(zhǔn)備:
1.PBS 緩沖液
2.蛋白定量試劑盒
耗材準(zhǔn)備:
1.離心管
2.吸頭
3.一次性手套
使用方法:
旋帽離心管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)液體灑落。
蛋白酶抑制劑在 2-8℃時(shí)是固體狀態(tài),從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或 37℃短時(shí)間水浴,變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開(kāi)蓋。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有試劑須預(yù)冷;所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過(guò)程須保持樣品處于低溫。本公司產(chǎn)品僅用于科研實(shí)驗(yàn)。
注意事項(xiàng):
1. 正式實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)選取幾個(gè)樣本做預(yù)實(shí)驗(yàn),以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)條件,取得佳實(shí)驗(yàn)效果。
2. 螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。
3. 禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4. 樣品或試劑被污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5. 好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并徹底殘留清潔劑。
6. 實(shí)驗(yàn)后完成后所有樣品及接觸過(guò)的器皿應(yīng)按照規(guī)定程序處理。
大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子BB(PDGF-BB)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
大鼠骨橋素(OPN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
凝血酶敏感蛋白-1 48T/96T
兔8-異構(gòu)前列腺素(8-epi-PGF2α)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人尿蛋白(UP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人FMS樣酪氨酸激酶3配體(Flt-3L)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
6酮前列腺素F1a 48T/96T
肝脂酶 48T/96T
人干細(xì)胞因子受體(SCFR)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人整合素αⅤβ3(Integrin αⅤβ3)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
α-血小板球蛋白 48T/96T
改良Lowry法蛋白定量試劑盒多藥耐藥相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-MRP2
核凋亡誘導(dǎo)因子蛋白1 規(guī)格: 0.2ml Anti-NAIF1 protein
磷酸化NFATc2(Ser326)抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-phospho-NFATc2(Ser326)
磷酸化一氧化氮合成酶3抗體(內(nèi)皮型) 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-eNOS (Ser113)
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子-3抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-NT-3
P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑 規(guī)格: 0.1ml Anti-P27 kip1
配對(duì)盒基因7抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-PAX7
核糖體S6蛋白激酶β2抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2
PEG3蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml Anti-PEG3
磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-PKC gamma (Thr514)
磷酸化蛋白激酶R抗體 規(guī)格: 0.1ml Anti-Phospho-PKR (Thr446)
通用凍存液 50ml 瓶
Saikosaponin B2 柴胡皂苷B2 58316-41-9 20mg
Clarithromycin 克拉霉素 5g 瓶
Kirenol 奇任醇 52659-56-0 20mg
1,5-Dicaffeoylquinic acid 1,5-二咖啡??鼘幩?30964-13-7 20mg
Allicin 大蒜素 539-86-6 20mg
Butyl paraben 對(duì)羥基苯甲酸丁酯 94-26-8 100mg
Benzoic Acid Sodium Salt 苯甲酸鈉 532-32-1 200mg
過(guò)濾篩(不銹鋼) 400目 個(gè)
35mm培養(yǎng)皿 20套 包