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血清質(zhì)量鑒定與防發(fā)揮方法
血清質(zhì)量鑒定與防發(fā)揮方法:
一 、鑒定的方法
1、理化性質(zhì):蛋白含量包括血清總蛋白含量、球蛋白含量、血紅蛋白含量等。其中球蛋白含量是一項(xiàng)非常重要的指標(biāo),血清中球蛋白主要是抗體,球蛋白含量越低血清質(zhì)量越高。血紅蛋白也是越低越好。
2、微生物檢測(cè):對(duì)支原體、病毒的檢測(cè),支原體是一種很小的微生物,可通過孔徑22u的濾膜。支原體、病毒污染在光學(xué)顯微鏡下難于察覺,細(xì)胞也能生長繁殖,但會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
3、促生長效果:這是血清重要的特性,應(yīng)當(dāng)以培養(yǎng)的細(xì)胞來檢測(cè)。
4、對(duì)于使用者:判斷血清質(zhì)量先從外觀入手。好的血清應(yīng)該是透明清亮,土黃色或棕黃色,無沉淀或極少沉淀,比較粘稠。如發(fā)現(xiàn)血清渾濁、不透明、含許多沉淀物,說明血清污染或血清中的蛋白質(zhì)變性;若血清呈棕紅色,說明血清中的血紅蛋白含量太高,取材時(shí)有溶血現(xiàn)象。
二 、防發(fā)揮的方法
1、使用前:必須滅活處理,56℃30分鐘。對(duì)于一些品質(zhì)高的胎牛血清和新牛血清可以考慮不經(jīng)滅活直接用于細(xì)胞培養(yǎng)。
2、儲(chǔ)存條件:一般儲(chǔ)存于-20℃,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,首先要滅活處理,然后分裝成小包裝,儲(chǔ)存于-20℃,使用前融化。融化時(shí)現(xiàn)置于4℃。融化后的血清在4℃不宜長時(shí)間存放,應(yīng)盡快使用。
3、使用濃度:自從有了合成培養(yǎng)基,血清就是作為一種添加成分與合成培養(yǎng)基混合使用,使用濃度一般為5-20%,常用是10%。過多血清容易使培養(yǎng)中的細(xì)胞發(fā)生變化,特別是一些二倍體的無限細(xì)胞系,迅速生長之后容易發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。
采購血清時(shí),先從供應(yīng)商處索取樣品進(jìn)行試驗(yàn),選定一批后就要保留足夠使用6個(gè)月至1年的量,直至用另一批經(jīng)過預(yù)先試驗(yàn)的樣品代替。