聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)，它可看作是生物體外的特殊DNA復(fù)制，PCR的*大特點(diǎn)是能將微量的DNA大幅增加。PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。

RT—PCR（Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction）是將RNA的反轉(zhuǎn)錄（RT）和cDNA的聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增（PCR）相結(jié)合的技術(shù)。

原理是提取組織或細(xì)胞中的總RNA或者mRNA，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下將RNA或者mRNA反轉(zhuǎn)錄成cDNA，再以該cDNA**鏈為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，根據(jù)靶基因設(shè)計(jì)用于PCR擴(kuò)增的基因特異的上下游引物，基因特異的上游引物與cDNA*1鏈退火，在Taq DNA聚合酶作用下合成cDNA第2鏈。再以cDNA**鏈和第2鏈為模板，用基因特異的上下游引物PCR擴(kuò)增獲得大量的cDNA。

Real-time PCR（實(shí)時(shí)熒光定量PCR）也可以縮寫(xiě)為RT—PCR，此外還有一個(gè)qPCR（Quantitative Rea-ltime-PCR ），有人可能將這三者搞混。

其實(shí)Rea-ltime-PCR和 qPCR（Quantitative Rea-ltime-PCR ）都是指實(shí)時(shí)定量PCR，即在PCR進(jìn)行的同時(shí)，對(duì)其過(guò)程進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)，可以對(duì)起始模板數(shù)量進(jìn)行**的分析。并且國(guó)際上的約定俗成的是：RT-PCR特指反轉(zhuǎn)錄PCR，而Real-time PCR一般縮寫(xiě)為 qPCR（quantitative real-time PCR）。

RT-PCR的方法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于RNA的構(gòu)造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表達(dá)解析等多種領(lǐng)域。